中国科学院重庆绿色智能技术研究院机构知识库

 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种利用级联放大效应高敏监测水体PAHs污染物的转荧光蛋白基因斑马鱼的研制方法。所述方法以UAS‑Gal4基因表达调控系统为基础，利用优化重组的多环芳香烃响应元件AhREs驱动上游质粒Gal4的表达，进而对下游UAS质粒中荧光基因eGFP表达进行调控；同时创新性结合TALE‑TF转录激活增强技术，通过TALE转录激活效应进一步增强eGFP基因的表达量，达到多重增加荧光信号的目的；最终利用I‑SceI大范围核酸酶转移系统，可以获得稳定遗传的低拷贝诱导性转荧光蛋白基因斑马鱼，对斑马鱼毒性影响较小。通过制作对环境污染物高敏的转荧光蛋白基因斑马鱼，实现对水体中有毒污染物的简单、高效、灵敏、直观的监测。